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카테고리 : 레포트 > 자연과학계열 파일이름 :Polyacrylamide gel 만.docx 문서분량 : 5 page 등록인 : nav034545302 문서뷰어 : 
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- 같은분야 연관자료
- 보고서설명
- 1) 제목 : Polyacrylamide gel 만들기 및 SDS-PAGE, Coomassie blue staining
2) 요약 : 3주차 실험을 통해 column chromatography를 이용하여 특정 단백질 Naa30(size 40kDa)을 정제했다. 그 후 SDS-PAGE를 통해 각 tube에 들어있는 단백질들을 크기별로 전기 영동하여 겔 상의 Naa30 band를 찾아 순도 높게 검출된 것인지 확인한다.
3) 원리 및 배경
① SDS 역할 및 SDS-PAGE 실험 원리 : 단백질은 20개의 아미노산 조합으로 3차원 구조를 형성하기에 각자 가지는 전기적 성질이 다르다. 이러한 전기적 성질은 겔 내부 이동성에 영향을 주기에 분자량에 따른 분리가 불가능하게 한다. 따라서 단백질을 분자량에 따라 분리하기 위해 모든 단백질이 같은 전하/분자량 비율을 가지도록 해야한다. SDS는 계면활성제로, 단백질의 소수성 부분과 결합하여 3차원 구조를 풀어준다. 이로 인해 단백질은 SDS에 둘러싸여 모두 같은 전하/분자량 값을 가지게 된다. SDS-PAGE는 Sodium Dodceyl Sulfate PolyAcrylamide Gel Electrophoresis의 약자로, 혼합 단백질용액으로부터 특정 단백질을 분리할 때 사용되는 전기영동법이다. 단백질의 소수성 및 전기적 성질을 배재하고 크기에 따라서 분리 할 수 있다. SDS와 환원제를 처리해 가열하면 단백질이 아미노산 2개당 하나의 (-)로 masking 되고 이황화 결합이 끊어져, 변성된 선형 단백질이 만들어진다. 이를 다공성 gel에서 전기영동하여 분자량에 따라 분리한다.
- 본문일부/목차
- 1) 제목 : Polyacrylamide gel 만들기 및 SDS-PAGE, Coomassie blue staining
2) 요약 : 3주차 실험을 통해 column chromatography를 이용하여 특정 단백질 Naa30(size 40kDa)을 정제했다. 그 후 SDS-PAGE를 통해 각 tube에 들어있는 단백질들을 크기별로 전기 영동하여 겔 상의 Naa30 band를 찾아 순도 높게 검출된 것인지 확인한다.
3) 원리 및 배경
① SDS 역할 및 SDS-PAGE 실험 원리 : 단백질은 20개의 아미노산 조합으로 3차원 구조를 형성하기에 각자 가지는 전기적 성질이 다르다. 이러한 전기적 성질은 겔 내부 이동성에 영향을 주기에 분자량에 따른 분리가 불가능하게 한다. 따라서 단백질을 분자량에 따라 분리하기 위해 모든 단백질이 같은 전하/분자량 비율을 가지도록 해야한다. SDS는 계면활성제로, 단백질의 소수성 부분과 결합하여 3차원 구조를 풀어준다. 이로 인해 단백질은 SDS에 둘러싸여 모두 같은 전하/분자량 값을 가지게 된다. SDS-PAGE는 Sodium Dodceyl Sulfate PolyAcrylamide Gel Electrophoresis의 약자로, 혼합 단백질용액으로부터 특정 단백질을 분리할 때 사용되는 전기영동법이다. 단백질의 소수성 및 전기적 성질을 배재하고 크기에 따라서 분리 할 수 있다. SDS와 환원제를 처리해 가열하면 단백질이 아미노산 2개당 하나의 (-)로 masking 되고 이황화 결합이 끊어져, 변성된 선형 단백질이 만들어진다. 이를 다공성 gel에서 전기영동하여 분자량에 따라 분리한다.
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