해피레포트 - 생명과학 - 타액의 상피세포와 근유조직세포, 혈액의 백혈구 등으로 부터 DNA를 추출, 정제해내는 실험

카테고리 : 레포트 > 의학계열 파일이름 :생명과학 - 타액의 상피세포와 근유조.hwp 문서분량 : 5 page 등록인 : leewk2547 문서뷰어 : 한글뷰어프로그램 등록/수정일 : 13.04.25 / 13.04.25 구매평가 : 다운로드수 : 0 판매가격 : 2,000 원

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보고서설명
이번 실험은 생명을 이루는 가장 핵심 물질인 DNA를 RFLP 방법을 이용해 ADH와 ALDH2의 유전자형 분석을 하고 각종 sequencing 방법을 이용해 polymorphism을 찾아내기 위한 과정의 첫 단계로 DNA를 3가지의 세포에서 분리, 추출해내는 실험이다. 분리, 추출해낼 세포는 타액의 상피세포와 소의 근육조직 세포, 그리고 혈액의 백혈구 세포이고 각 세포들은 pre-lysis, cell-lysis, isolating gDNA 과정을 거쳐 DNA를 분리, 추출해낸다.

본문일부/목차
근육세포의 경우 pre-lysis 단계에서 조직이 덩어리 져 있기 때문에 최대한 잘게 썰어 반응 표면적을 넓히고 cell-lysis에서 조직을 풀기위해 tissue lysis buffer와 protease를 첨가해준다. 그리고 백혈구세포의 경우는 핵이 없는(DNA가 없는) 적혈구를 제거하기 위해 RBC lysis buffer를 pre-lysis 단계에서 넣어주고 cell-lysis 단계에서 nuclei lysis buffer와 protease를 함께 넣어주는 차이만 있다. 실험결과, 8개의 타액샘플에서는 1개의 DNA band만 관찰할 수 있었고, 근육세포에서는 2개의 sample 모두에서 band를 확인하였고, 백혈구세포에서는 2개중 1개의 sample만 band가 나타났다. 타액의 경우 sample 채취가 각기 다른 피험자로부터 이루어졌지만 band의 유무가 너무 확연했기에 실험과정에서 타액과 NaCl buffer 비율 조절 실패에 의한 DNA 손상이나 상층액 제거과정에서 pellet이 딸려온 경우 등을 생각해 볼 수 있었고 혈액 세포도 마찬가지로 RBC lysis buffer의 농도 조절 실패로 RBC cell뿐 만 아니라 백혈구에 까지 lysis가 일어났을 가능성을 생각해 볼 수 있었다. 마지막으로 근육세포는 두 가지 sample모두에서 band가 나타났지만 band가 상대적으로 굵고 진한 것과 연한 것이 나타났다. 또한 다른 조직세포들에 비해 유독 작은 size band에서 많은 band들이 나타났다. 먼저 두 band간의 상대적 굵기와 진하기는 DNA의 추출 과정에서 좀 더 정교함과 연관될 수 있겠고, 작은 size band들은 근육세포에만 유독 많은 미토콘드리아가 가진 상대적으로 작은 크기의 DNA들에 의해 나타난 것으로 볼 수 있을 것이다.

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