액체크로마토그래피-HPLC에의한카페인분석
ABSTRACT
분리와 분석은 화학에서 아주 중요한 작업 중 하나이다. 이 중 분리에 가장 광범위하게 사용되는 방법은 크로마토그래피(chromatography)로써, 극성 유무에 의한 인력과 반발의 원리를 이용하는 방법이다.
이번실험에서는 다양한 크로마토그래피 방법 중에서도 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)를 이용해서 아데닌(Adenine)과 카페인(Caffeine)의 RT(Retention Time)와 가장 잘 흡수하는 파장을 알아내어 이 정보를 가지고 커피 한 잔에 들어있는 카페인의 양을 구해본다.
실험 1 에서는 아데닌과 카페인 중 어느 것이 먼저 elution(용리)되는가를 관찰해보고, 그 때의 RT값을 각 물질의 구조와 관련지어 생각해본다.
실험 2 에서는 아데닌과 카페인이 빛을 최대로 흡수하는 파장을 알아봐서 우리의 궁극적인 실험인 커피분석에서 필요한 각각의 흡수 스펙트럼을 얻는다.
실험 3 에서는 커피 안 잔에 들어있는 카페인의 양을 구하기 위해 100 M와 200 M의 카페인의 실험결과를 이용해서 Standard curve를 만들고 구한 수식에 대입해서 농도를 구한다. 그런 다음에 카페인의 화학식량을 이용해 커피 100㎖에 들어있는 카페인의 양을 구해본다.
INTRODUCTION
첫째로, 이번 실험의 핵심 기기인 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)에 대해 알아보자. HPLC는 고속 액체 크로마토그래피라고도 하는데, 보통의 액체 크로마토그래피에서 입자를 더욱 작게 하고, 가는 분리관을 사용해서 알맞은 압력을 가하여 용매를 흘리면, 기체 크로마토그래피와 같은 속도로, 뛰어난 분리기능을 얻을 수 있다. 충전제로는 10~15㎛의 다공질 중합체 또는 비 다공질인 작은 입자에 실리카겔과 같은 것이 엷은 층을 만들어 여기에 액체를 입힌 것 등이 쓰인다. 도입 압력은 100~300...
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