색소분리와 흡광분석
. Abstract&Introduction
두 가지의 식용색소를 각각 10배 묽히고 다시 2 3, 1 3로 묽힌 후 흡광도를 측정한 다음에 이 세점을 이용하여 검정곡선을 그린다. 이 검정곡선을 통해 혼합용액(M)에서의 용액 Y와 용액 B의 혼합비율과 각 몰 수를 구한다. 그리고 c-18카트리지를 이용하여 두 가지 색소의 혼합용액을 분리함으로써 소수성 상호작용, 분배 등의 원리 등을 익히고, 분리한 새고를 흡광분석하여 회수율을 계산하여 본다.
실험원리
1) 분배 크로마토그래피
분배 크로마토그래피의 정지상은 비활성 교체위에 지지된 액체이다. 이동상은
액체(액체-액체 분배 크로마토그래피) 또는 기체(기체-액체 크로마토그래피,
GLC)이다. 액체-액체 분배의 점상 방식에는 극성 정지상(ex. 실리카 상의 메탄올)과
비극성 이동상(ex. 헥산)을 사용한다. 극성 화합물은 머무름이 커지고 비극성
화합물은 발리 용리되는 이 방식을 ‘점상 크로마토그래피’라고 한다. 비극성 정지상과
극성 이동상을 이용하면 비극성 용질은 오래 머무르고 극성 용질은 쉽게 용리
된다. 이 방식을 ‘역상 크로마토그래피’라고 하며, 실제로 가장 널리 사용된다.
2) Beer의 법칙
어떤 시료에 의해 흡수된 단색 파장의 복사선의 양은 보통 Beer의 법칙(Beer`s
law)이라 부르는 Beer-Bouguer-Lambert 법칙에 의하여 설명된다. 투과된
복사에너지의 분율이 통로길이에 따라서 지수적으로 감소하므로, 다음과 같이
지수형태로 표시할 수 있다.
T==10-Kb
여기서 K는 상수이고, ...
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