실험날짜 2002년 9월 5일
▒ 염색 ▒
광선 현미경을 사용하여 세포나 조직의 구조를 관찰하기 위해 각종 염료를 사용하여 착색하는 과정
▒ 염색 준비물
여러종류의 Coplin staining jar 수평염색 용기 수평염색용기와 슬라이드 운반대
▒과정
ㅡ기본적인 염색 진행과정을 기술
▷▶탈 Paraffin(Deparaffinization)단계(Xylene으로 Paraffin을 제거하는 단계)
①일반적으로 Paraffin 절편에 대한 염색법이나 도은법에 사용되는 염색액들이 Paraffin에 침투되지 않기 때문에 먼저 Paraffin을 유기용매(Xylene, Benzene 등)로 제거해야 하는데 바로 이 과정을 탈 Paraffin(Deraraffinization)단계라 부른다. 결국 이 과정은 염색액들이 조직절편에 침투되 들어갈 수 있더록 하는데 있다.
②Xylene이 담겨진 염색용기를 3개 준비하여 절편을 각 용기에 3-5분 간씩 방치하면 Paraffin이 완전히 제거된다.
③탈 Paraffin된 조직절편은 절편내로 Xylene이 들어가 굴절율이 높아져 매우 토명한 상태 가 되어 눈에 잘 보이지 않게 된다.
④탈Paraffin된 조직절편이 뿌옇게 보이는 것은 신전기에서 Slide가 완전히 건조되지 않아 물이 Xylene에 혼입되었기 때문이다.
⑤60℃되는 부란기나 신전기에서 나온 절편 Slide은 Xylene에 들어가기 전에 실온 온도에서 식힌 다음 탈 Paraffin시킨다.
▷▶함수(Hydration)단계(고농도 Alcohol에서 저농도 Alcohol을 거치는 함수단계)
①염색액이 대부분 수용액 상태이므로 절편내에 물을 포함도록 하여 염색액이 조직내로 잘 유도되지도록 하는데 있다.
②5-6개의 염색용기에 무수 Alcohol로부터 70% Alcohol까지 단계별(고농도에서 저농도로)로 준비한다.
③탈 Paraffin된 조직절편을 각...
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