해피레포트 - [레포트] Maxam / Maxam Gilbert method

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Maxam-Gilbert method(Chemical method) 세...

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Maxam-Gilbert method(Chemical method) 세포책 496페이지 참고-근데 딱한줄 나와있더라.... -어떤 특정 염기에서 DNA를 쪼개는 화학물질을 사용한다.(nonprotein)⑴ Maxam-Gilbert법(1977년) DNA의 5’-phosphate group을 32P로 labelling 특정 염기만 변형시키는 화학약품을 처리 piperidine과 같은 시약 처리하면 변형된 특정염기만을 잘라낸다 각 deoxynucleoside triphosphates(dNTPs)에 대한 특이적인 시약을 각각 분리 반응시킨 후 SDS-PAGE2(SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) 하여 radiography하면 서열을 확인할 수 있는 방법 ⑵ Sanger법(1977년) = dideoxytermination법 dideoxynucleotide triphosphates(ddNTPs)와 DNA polymerase를 사용하는 방법 중합효소는 3’OH가 없는 ddNTP를 이용해서는 DNA를 합성할 수 없으므로(인산과 ester 결합이 안된) 각각의 ddNTP에서 합성이 끝나게 된다 간단히 말씀드리자면 1)은 특정한 염기를 자르는 화학약품을 처리합니다. 실제적으로 하는 방법은 약간 다릅니다만 쉽게 설명 드리기 위해 적습니다. A만 자르는 약품, T만 자르는 약품, C만 자르는 약품, G만 자르는 약품을 각각 DNA에 처리합니다. 이때 약품의 농도를 잘 조절하면 한개의 DNA에서 한개의 염기만을 자르게 할 수 있습니다. 잘린 DNA를 전기영동을 통해 분석하면 각 염기의 순서를 알 수 있죠. 2)는 자르는 것이 아니라 붙여 나가는 것입니다. DNA가 생성되게 반응을 시킵니다. 그러면 원래의 DNA를 가지고 원래의 형태와는 상보적으로(분자생물학에서 매우 중요한 개념입니다.. 이건 공부하세요) DNA를 합성해 나갑니다. 합성해나가는 DNA에 더이상 나가지 못하게 하는 ...

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