해피레포트 - [생명공학] DNA와 물질대사

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[생명공학] DNA와 물질대사 - 대학 레포트 제출자료

본문일부/목차
[생명공학] DNA와 물질대사 13쪽 DNA의 복제에는 DNA polymerase(Dpase)가 관여한다. 오늘날 세종류(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)의 Dpase가 알려져 있다. Dpase Ⅰ은 아마 1100개의 아미노산으로 된 1본의 polypeptide로 되었고, 1956년에 Kornberg에 의하여 발견되었다. Kornberg의 DNA polymerase(오늘날의 DNA polymerase Ⅰ)는 DNA를 주형에 DNA를 합성하여 만들어진 DNA의 조성이나 nucleotide 배열은 주형 DNA의 그것과 유사하다. 이 효소는 대장균당 약 1만 분자가 존재하고 있을 것으로 생각한다. 네 종류의 dXTP를기질로 하여 primer DNA, 주형(template)DNA, Mg2+ (또는 M2+)존재하에서 이 primer에 nucleotide를 연결하여 DNA를 합성한다. 이 반응은 다음과 같다. + primer DNA → DNA ― + (n1+n2+n3+n4)PPi 이 효소에 의하여 합성된 DNA는 2중 나선 구조를 가져 그 염기조성은 가해진 주형 DNA의 염기조성과 일치하여 A=T, G=C의 관계를 만족시킨다. 또 인접 nucleotide의 출현빈도(보기로서 dA32PPP를 사용하여 DNA를합성하여 적당한 nuclease로 5‘ 측을 끊으면 dA의 3’측의 dX에 32P가 붙어 이것을 분석하면 dA의 이웃에 어느 염기가 오는 가의 빈도를 알 수 있다. 마찬가지로 dG, dT, dC에 대하여서도 조사된다)도 주형 DNA와 일치된다. 이 효소를 사용하여 있는 φX174 phage를 in vitro에서 합성할 수도 있다. 그래서 이 효소가 5‘→3’ 방향으로 합성을 하는 것을 암시해 주고 있다. 그러나 이 효소의 in vitro에서의 DNA합성속도는 복제에 관여한다고 생각되는 만큼 늦은 것으로 합성된 DNA는 분지된 곳이 많으므로 이 효소가 참으로 복제를 하는 가는 의문점이 있다. 오랫동안 1969년에 De Lucia와 Cairns는 DNA polymerase Ⅰ결손 Ⅰ의 대장균 돌연변이 균주를 분리하였다. DNA polymerase Ⅰ이 세포 내에서 일어나는 DNA합성의 실체에 관여하는 것이라면, 이 효소에 결손 돌연변이 균주는 생존하지 않는다고 한다. 이것이 생존되지 못하는 것은 polymerase Ⅰ이외에도 polymerase가 존재하는 것을 나타낸다.

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