해피레포트 - [레포트] Sanger 방법

카테고리 : 레포트 > 기타 파일이름 :Sanger 방법.hwp 문서분량 : 3 page 등록인 : image 문서뷰어 : 한글뷰어프로그램 등록/수정일 : 08.01.29 / 08.01.29 구매평가 : 다운로드수 : 0 판매가격 : 500 원

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Sanger 방법Fredrick Sanger가 처음으로 고안한 염기서열 ...

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Sanger 방법Fredrick Sanger가 처음으로 고안한 염기서열 분석방법입니다. 가장 기본적인 개념은 원래의 DNA를 주형으로 삼아 표지된 DNA를 합성해 나가는 방식으로 염기서열을 분석하는 것입니다. 그러면 G, A, T, C를 어떻게 아느냐. 그것은 바로 ddNTP에 있습니다. DNA를 합성해 나갈때 원래는 dNTP(dGTP, dATP, dTTP, dCTP를 합쳐서 dNTP라 합니다.)를 사용합니다. dNTP를 사용하면 지속적으로 DNA를 합성할 수 있는 반면에 ddNTP를 사용하면 DNA합성이 중단됩니다. 이것은 DNA의 ribose의 3번탄소에 OH- 대신 H+가 붙어있기 때문에 더이상 염기를 붙일 수 없기 때문입니다. 즉, 안정성을 같게 되는 것이지요. 다량의 dNTP와 적정농도의 ddNTP가 있으면 어느정도 DNA는 합성되어 나가다가 dNTP대신에 ddNTP가 들어오면 DNA의 합성은 중단됩니다. 따라서 각기 4개의 반응을 따로 시킵니다. 한개에는 dNTP와 ddGTP가 들어있는것, 다른것은 dNTP와 ddATP, dNTP와 ddTTP, dNTP와 ddCTP 입니다. 이렇게 Sequencing Well에 각각 넣고 반응시키면 각 반응은 ddGTP가 있는 것은 G에서 끝나고 ddATP가 있는 것은 A에서 반응이 끝나게 됩니다. 이런식으로 하면 각기 마지막에 오는 염기가 반응에 들어간 ddNTP와 동일하게 되겠죠. 이것을 전기영동하여 각 크기별로 구별하면 염기서열을 읽을 수 있습니다. --- 요즘은 automatic Sequencing을 많이 하죠 ^___^ 만일, GATTAGTCA라는 염기서열을 가진 DNA가 있다고 합시다. 반응을 각기 4개를 합니다. 그러면 다음과 같은 새로합성된 DNA가 만들어집니다. ddGTP가 있는 곳 G, GATTAG ddATP가 있는 곳 GA , GATTA , GATTAGTCA ddCTP가 있는 곳 GATTAGTC ddTTP가 있는 곳 ...

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