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[일반생물학] 고체배지제조, 멸균 및 균락 관찰[예비 보고서
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[일반생물학] 고체배지제조, 멸균 및.hwp
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등록인 leewk2547
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등록/수정일 13.07.18 / 13.07.18
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고체배지제조, 멸균 및 균락 관찰 / 4월 4일
2. 실험목적
고체평판배지의 제조법을 익히고 이 배지를 멸균하면 그 안의 모든 미생물이 사멸하기 때문에 충분한 배양시간이 경과하여도 배지 내에 미생물이 생장할 수 없는 것을 관찰한다. 그러나 잘 멸균된 고체배지에 대장균을 접종하여 순수배양(pure culture)하면 대장균 균락(colony)을 관찰할 수 있음을 확인한다.
- 본문일부/목차
- ① 고체배지의 제조
1) 1l 배지제조용 병에 증류수를 600~700ml(보통 2/3 정도) 채운다.
2) 배지의 각 성분을 저울로 정량하여 증류수가 든 병에 넣는다(이때 agar는 넣지 않는다).
3) 증류수를 추가하여 총 1l가 되도록 채운다(이때 병주위에 붙은 배지분말을 씻어내면서 채우도록 한다.)
4) 배지성분을 자석 교반기(magnetic stirrer)를 이용해 완전히 녹인 후 pH meter를 이용해서 배지의 pH를 7로 보정한다.
5) 보정된 배지에 한천을 넣고 가열 교반기를 이용해서 완전히 녹인다.
6) 배지병의 뚜껑을 닫고 고압멸균기(121°C, 15psi, 15min)에 넣고 멸균시킨다(이때 병의 뚜껑은 꽉 닫지 않도록 한다).
7) 배지를 멸균하는 동안 클린벤치(clean bench)에 멸균배양접시(petri dish)를 준비해 놓는다.
8) 배지의 멸균이 종료되면, 클린벤치로 가져와 미리 준비된 배양접시에 차례차례 붓는다(1l 배지의 경우 30개 정도 멸균배양접시를 준비하면 된다).
9) 배지를 부은 배양접시는 배지가 다 굳을 때까지 클린벤치에서 냉각시킨 후 사용하며 추후 사용할 경우에는 멸균비닐봉지에 넣어 냉장고에 보관한다.
· 액체배지의 경우 고체배지의 제조에서 agar를 제외하면 된다.
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#일반생물학
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