해피레포트 - 제한효소를 통한 DNA 분해와 전기 영동

카테고리 : 레포트 > 의학계열 파일이름 :제한효소를 통한 DNA 분해와 전기.hwp 문서분량 : 7 page 등록인 : leewk2547 문서뷰어 : 한글뷰어프로그램 등록/수정일 : 12.05.25 / 12.05.25 구매평가 : 다운로드수 : 3 판매가격 : 1,500 원

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보고서설명
이번 실험에서는 8주차 실험에서 추출해낸 DNA를 제한 효소를 사용하여 여러 개의 DNA 조각으로 분리한 후, 전기영동을 통하여 원하는 DNA 분자가 유입되었는지를 확인한다.

본문일부/목차
이번 실험에는 DNA를 제한 효소로 절단하는 과정이 포함되어 있다. 제한 효소는 원래 세균이 침투한 외래 DNA를 변형 및 파괴시키기 위하여 존재하는 효소이다. 그러나 이 제한 효소는 그 세균의 DNA도 절단할 수도 있기 때문에 그것을 방지하기 위해 세균은 자신의 DNA에 메틸화(methylation)을 하는 등의 방법을 통해 자신의 DNA를 보호한다. 제한 효소는 이중 나선 구조로 된 DNA의 회문식 염기서열, 즉 앞으로 읽으나 뒤로 읽으나 염기서열이 같은 모양을 하고 있는 특징적인 염기서열을 인식하여 절단한다. 잘린 후의 DNA 말단의 모양은 두 종류가 있다. 말단이 엇갈리게 잘린 말단을 점착말단(sticky end)라고 하고, 말단이 일자로 잘린 말단을 평활말단(blunt end)라고 한다. 이 말단의 모양은 두 종류가 서로 다른 성격을 나타내므로 필요한 용도에 맞춰 원하는 말단을 얻을 수 있는 제한 효소를 사용해야 한다. <1> 이번 실험에서 사용하는 제한 효소는 두 종류가 있다. EcoR I 효소와 Pst I 효소를 사용하는데 두 효소 모두 점착식 말단(sticky end)를 형성한다는 공통점이 있지만 인식하는 회문식 염기서열이 다르기 때문에 같은 DNA를 자를 때에도 다른 부위를 자른다. 다음은 그 두 효소의 인식 부위와 절단 후의 모습을 나타낸 표이다. 그리고 전기영동을 간단히 설명하자면 다음과 같다. DNA와 같은 생물학적 분자들은 전하를 띠고 있다. 그리고 DNA 같은 경우에는 인산기 때문에 음전하를 띠고 있기 때문에 전지의 음전하에서 양전하 쪽으로 이동한다. 그리고 그 과정은 DNA가 agarose gel을 지나면서 받는 여러 가지 요인에 의한 마찰력의 영향을 받는다. 그 중 가장 큰 요인은 DNA 조각의 분자량으로, 분자량에 클수록 더 느리게 이동하여 분자량 순서를 따라서 DNA 시료가 여러 개의 띠로 나뉘는 것을 관찰할 수 있다. 그리고 DNA 전기영동에서 영향을 줄 수 있는 요인들은 DNA 분자의 크기(분자량)와 구조, Agarose gel에서 agarose의 농도, 그리고 가해준 전압 및 전기장 등이 있다

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