4. Method
(1) Cell culture
① 플라스크 속에 존재하는 BGM cell의 원래 들어있던 배지를 suction하여 제거한다.
② PBS 5ml를 넣는다.(washing)
③ PBS를 suction하고 0.5x TE를 0.1배 volume, 즉 0.5ml 넣어준 후 cell에 고르게 퍼지게 한 후 37℃ incubator에 2분 정치한다.
④ 10% FBS가 포함된 DMEM배지를 5ml 넣어준 후 pipeting 한다.
⑤ Cell culture dish에 seeding한다.
(2) Virus infection
① 배지를 suction하여 제거한다.
② Virus stock이 포함된 배지를 고르게 뿌려준다.
200ul (바이러스) + 800ul(free FBS 배지) = 1ml
③ 한 시간 후에 stock이 포함된 배지 suction하고 PBS로 2회 washing한다.
④ PBS suction 후 10% FBS가 포함된 DMEM배지를 넣어준다.
⑤ 약 6시간 후에 배지와 cell을 수거한다.
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