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자연과학계열
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생물학 실험 - 크로마토 그래피를 이용한 잎의 색소분리 실험
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생물학 실험 - 크로마토 그래피를 이.hwp
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등록인 leewk2547
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등록/수정일 15.03.18 / 15.03.18
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- 보고서설명
- 식물은 태양에너지와 몇가지 간단한 무기화합물을 이용해 세포내에 있는 엽록체에서 ATP와 산소를 만들어 내는데 이것을 광합성이라고 한다.
광합성의 종류에는 광화학적 광합성(명반응), 효소반응(암반응) 으로 나눌 수 있다. 여기서 명반응은 엽록체의 그라나(틸라코이드 막)에서 일어나는 반응이며 태양 에너지가 있을때 NADPH2와 ATP를 만들어 낸다. 암반응은 명반응의 산물인 NADPH2와 ATP를 이용하여 엽록체의 기질인 스트로마에서 CO2를 이용해서 포도당을 만드는 화학반응으로 칼빈회로라고도 한다.
- 본문일부/목차
- 크로마토 그라피의 원리
색소 혼합물에 들어있던 색소들은 이동 속도의 차이에 의해 서로 분리된다.
유기용매에 잘 녹는 색소가 덜 녹는 색소보다, 종이와의 흡착력이 적은 것이 종이와의 흡착력이 큰 것 보다, 분자량이 적은 것이 분자량이 큰 것 보다 전개율(Rf)이 더 높다.
이 실험에서는 식물의 엽록체에서 일어나는 광합성중 명반응에서 광인산화가 일어나게 해주는 엽록소를 크로마토 그래피를 이용해서 분리해본다.
1. 일정량의 시금치 잎을 아세톤(엽록소는 물에는 녹지 않지만, 아세톤이나 에테르와 같은 유기용매에는 잘 녹는다. 10ml를 넣고 (Hood 안에서) 막자사발로 곱게 간다.
2. 여과지를 세로 12㎝와 가로 1.5㎝ 크기로 자른다. 전개용매와 종이와 만나는 곳에서 1cm~1.5cm 떨어진 곳에 연필로 표시하고 전개용매를 전개시킬 만큼도 연필로 표지한다. 이때 여과지를 손으로 만지지 않도록 한다.
3. 모세관을 사용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다. 이때 점적된 부분이 가능한 원이 되도록 한다. 완전히 말린 후 입으로 호호 불어 말리고 이 과정을 4-5회 정도 반복하여 점적한다. (색소 농축 효과)
4. 여과지를 클립을 점적한 내용물과 전개용매가 닿지 않을 만큼을 측정해서 찝고 여과지가 시험관 벽면에 닿지 않도록 주의하고 전개용매에는 약 0.5cm 정도만 잠기도록 한다.
5. 전개용매가 여과지위에서 연필로 표시된 지점까지 오면 여과지를 꺼내서 완전히 말린다.
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#생물학 실험
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