해피레포트 - [PCR의 원리 이해 및 Primer 디자인] PCR의 원리 이해 및 Primer 디자인

카테고리 : 레포트 > 자연과학계열 파일이름 :PCR의 원리 이해 및 Primer 디자인.hwp 문서분량 : 3 page 등록인 : lbh313 문서뷰어 : 한글뷰어프로그램 등록/수정일 : 09.07.22 / 09.10.05 구매평가 : 다운로드수 : 7 판매가격 : 900 원

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보고서설명
PCR의 원리 이해 및 Primer 디자인인에 대하여 실험목적 및 원리에대하여 레포트한것입니다. 교수님께 A+ 받은 레포트니깐 많은 도움되실것으로 압니다.^^ [참고자료] 유럽 분자생물학회(European Molecular Biology Organisation ; EMBO)가 발간하는 학술지 “EMBO 보고(EMBO Reports)”, 온라인 속보판, 7월 9일자(doi : 10.1038/sj.embor.7400200)에 소개됨.

본문일부/목차
1. 주제 2. 실험목적 3. 실험원리 4. 실험재료 5. 실험방법 6. Result 7. Discussion 1. 주제: PCR의 원리 이해 및 Primer 디자인 2. 실험목적: 특정 DNA를 PCR하는 방법을 알고, 전기영동 결과를 통해 sequence의 size를 확인한다. 3. 실험원리: 이미 알고 있는 특정 DNA부위와 특이적으로 결합하는 primer를 제작하고 이를 이용해 반복 합성하여 PCR-tube 내에 원하는 DNA분자를 증폭시키는 방법으로서 미량의 DNA를 다량으로 얻을 수 있는 분자생물학적으로 중요한 기법이다. 이와 같이 증폭된 DNA는 Cloning 등의 분자생물학 실험, 유전성 질병인 진단, 감염성 질환의 진단 등에 다양하게 이용된다. 4. 실험재료: Template: pBSIIKS + sGFP, primer(Forward, Reverse), 10mM dNTP, Ex-Taq polymerase, 10x Buffer, D.D.W, pipet, PCR기기, tip, tube. 5. 실험방법 DDW 41.2㎕ 10x Buffer 5㎕ Template 1㎕ Forward primer 1㎕ Reverse primer 1㎕ 10mM dNTP 0.5㎕ Ex-Taq polymerase 0.3㎕ ①옆의 표의 순서로 위에서부터 아래로 pipet으로 tube에 넣어 준다. ②Tube의 mixture가 잘 섞이도록 손으로 Tapping 한다.(3회) ③약하기 centrifuge 한다. - 몇 초만 ④PCR기기에 35cycle 정도 돌린다. ⤷온도에 민감함, 가장 나중에 넣어 준다. 6.Result 1) Primer Design ⦁Forward Primer: 5` AATCTGCAGATGGTGAGCAAGGGCGAGGA 3` ⦁Reverse Primer : 5` ATAGTCGACCTTGTACAGCTCGTCCATGC 3` extra sequence↲ ⤷restriction enzyme 2) 전기영동 결과 (PCR 35 cycle후) M 4-2 4-1 3-2 3-1 2-2 2-1 1-2 1-1 - Marker가 아래에서부터 100,200... 표시되어 있으므로, 우리분반의 band는 700bp 부근에 서 관찰되었음을 알 수 있다. ↳ 우리가 증폭하고자한 sequence가 700bp 였으므로 PCR이 잘되었음을 알 수 있다. - 전체적으로 증폭된 양은 작아서 흐렸지만, 특히 3, 4조의 band가 연하게 관찰되었다.

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