전기영동 (electrophoresis) 실험보고서 입니다.
DNA 전기영동 (Electrophoresis)의 원리를 이해하고, 전기영동을 통하여 플라스미드(plasmid)의 크기를 알아 본 실험 보고서 입니다.
본문일부/목차
목차
1. 실험목적
2. 실험이론
3. 실험방법
4. 실험결과
5. 실험고찰
본문일부
- 전기영동 정의 및 원리
전기영동은 DNA나 단백질을 크기에 따라 분리하기 위한 방법 중 하나이다. DNA와 단백질은 전기적 성질인 전하를 띠고 있기 때문에 전기를 흐르게 해주면 각 분자의 전기적 특성에 따라 전장을 이동하게 된다. DNA의 경우에는 음전하를 띄며, 전장에서 양극 쪽으로 전기가 이동한다. 단백질은 그 각각마다 전기적 특성이 다르기 때문에 단백질에 시약을 주어 음전하를 띠도록 한 후 전기영동을 한다. 이렇게 시약을 주면 DNA와 같이 전기가 음극에서 양극으로 이동하게 된다. DNA와 단백질의 전장 이동속도에 가장 큰 영향을 주는 것은 분자량이다. 그러므로 분자량이 가벼울수록 상대적으로 멀리 이동이 가능하다. 전기영동을 통하여 얼마나 멀리 이동했는가의 거리의 측정에 따라서 각각의 크기를 계산할 수 있는 것이다.
전기장에서의 이동성은 완충용액의 이온 강도와 조성에 의하여 영향을 받는다. 이온강도가 낮으면 DNA의 이동이 느려지고, 이온 강도가 높으면 열이 발생하여, 그 열이 높은 경우에는 겔이 녹거나 DNA의 구조가 변할 수도 있다.
- 아가로오스 젤을 1%로 만드는 이유
전기영동이란 크기별로 구별하는 방법이다. agarose gel의 농도에 따라 분리되는 DNA의 size가 다르게 된다. 0.6%의 경우 1000~20000bp 크기의 사이즈, 0.7%는 800~10000bp, 1.0%의 경우에는 500~7000bp,
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